Испытатния препарата Нерестин при воспроизводстве толстолобика и амура в опытном рыбхозе «Селец» республики Беларусь

Испытатния препарата Нерестин

при воспроизводстве толстолобика и амура

в опытном рыбхозе «Селец» республики Беларусь.

Пущинский государственный университет,

проблемная лаборатория аквакультуры южного Подмосковья, Россия.

За счет естественного нереста воспроизводится значительная часть пресноводных рыб. Однако в результате экологических катастроф, регулярных аварийных и залповых сбросов сточных вод, хронических токсикологических загрязнений, браконьерства и нерегулируемого промысла условия естественного воспроизводства рыб в России резко ухудшаются. В ряде случаев альтернатива искусственному воспроизводству рыб просто отсутствует. Поэтому оно является главной составляющей современной аквакультуры [1].

Восстановление ихтиофауны естественных водных экосистем через искусственное воспроизводство ценных видов рыб с выпуском молоди в природную среду обитания, как и индустриальное товарное рыбоводство, основаны на т.н. заводском методе получения рыбопосадочного материала. Метод заключается в том, что половозрелым, физиологически подготовленным производителям рыб вводят натуральные или искусственные гонадотропные препараты. С наступлением овуляции у самок и спермиации у самцов половые продукты отцеживают, икру оплодотворяют и инкубируют, далее получают предличинок и личинок рыб, их подращивают до жизнестойких «деловых», затем выращивают до сеголетков, годовиков и двухлеток, и этим рыбопосадочным материалом (РПМ) зарыбляют водоемы.

В развитии высокопродуктивных экосистем и товарного рыбоводства во внутренних водоемах России, Украины, Беларуси, других государств, особенно в искусственных экосистемах на теплых водах и в хозяйствах III – VII зон рыбоводства, определяющее значение сейчас имеют дальневосточные растительноядные рыбы (РЯР): белый и пестрый толстолобики (БТ, ПТ), белый амур (БА). Биотехника разведения и выращивания этих чувствительных к экологии интродуцентов ведет начало с конца 30-х годов XX века и в послевоенное время в деталях разработана российскими учеными-рыбоводами [2]. По экспертным оценкам, из внутренних водоемов России ежегодно можно получать не менее 1 млн. тонн товарной продукции РЯР, а имевшиеся к 2000 году в хозяйствах инкубационные цеха могли обеспечивать получение 3 млрд. личинок этих рыб. [1].

Основой биотехники воспроизводства РЯР долгое время был метод гипофизарных инъекций (введения водных суспензий натурального ацетонированного гипофиза рыб) или хорионического гонадотропина. Последний действовал только на толстолобиков, но не на амура. С 80-х годов в мировой аквакультуре интенсифицировались работы по замене устаревших гипофизарных и иных гормональных стимуляций на новые технологии с введением негормональных синтетических препаратов. Действительно, суспензия гипофиза нестерильна, требует применения антибиотиков, она не обладает стандартной активностью; последняя зависит от индивидуальных различий рыб (пола, возраста, размера, кондиции) и других факторов. Дозировка требует дополнительного пересчета мг гипофиза на мл суспензии в зависимости от веса рыбы; суспензию надо готовить самим рыбоводам перед каждым инъецированием. Она нестойка при хранении даже в охлажденном виде. Высушенный «ацетонированный» гипофиз в течение 1 года сильно теряет активность. Этот гормональный препарат содержит комплекс посторонних активных веществ помимо необходимых гонадотропинов, способен вызывать анафилаксию и воспалительные процессы, побочные реакции типа помутнения глаз, особенно у БТ, и тромбов ястыка вплоть до гибели производителей. Гипофиз из одних видов рыб не всегда или не полностью пригоден для других видов. Заготовка его трудоемка, неэтична и неэстетична (вскрывают череп у живых рыб), производится только в определенное время года после вылова рыбы (при ее наличии). Дегипофизированная рыба как товар сильно теряет в цене реализации. Приобрести гипофиз непросто, острый дефицит наблюдается уже сейчас. Цена его высока, от 250$ и более за 1г. При дозе 4 мг/кг веса рыбы инъекция средней самке ПТ стоит от 10$.

Рыбы как объект искусственного воспроизводства в экологии, товарном, любительском, декоративном рыбоводстве и особенно в аквариумистике обладают значительным видовым разнообразием. Разные виды могут иметь резкие различия физиолого-биохимической регуляции процессов размножения. Разработка новых препаратов и технологий получения качественных половых продуктов от производителей разных видов рыб требует полидисциплинарного биологического образования и тесного сочетания академической и прикладной науки с рыбоводной практикой. В России ведутся разработки препаратов серии «Нерестин» (от русского слова «нерест») и техники их применения. Эти препараты, преодолевая меркантильный консерватизм гипофизарных «череповскрывателей», испытываются и внедряются в практику работы инкубационных цехов рыборазводчиков I-VII зон рыбоводства разных регионов России, ближнего и дальнего зарубежья. За 18 лет инъецировано Нерестином не менее 100 тыс. производителей разных видов рыб и получено около 10 млрд. деловых личинок. Данные «деликатного действия» негормональные препараты стерильны, не требуют применения антибиотиков и всегда готовы к работе; обладают стандартной активностью и удобной для применения дозировкой – в мл/кг веса рыбы; имеют длительный срок годности – не менее 3-х лет с потерей активности не более 5% в год; не содержат посторонних веществ и не дают побочных реакций; возможно быстрое удовлетворение любых потребностей в любое время при цене дешевле гипофиза на 20-30%. И главное: синтез препаратов не зависит от наличия рыбы для выемки гипофиза, от иных природных компонентов и эколого-токсикологических аномалий; воспроизводство исчезающих, редких и ценных рыб можно начинать от их единичных экземпляров в локальных экосистемах [3,5].

Для РЯР, как основных объектов пресноводной аквакультуры, разработана инструкция по применению Нерестина-1,1А,1Б [4]. Однако, несмотря на длительный и массовый опыт испытаний и внедрений данной технологии, даже в очень сильных хозяйствах остаются некоторые типичные погрешности в технике применения препаратов, существенно занижающие конечный производственно-экономический результат ввиду получения рыбоводно-биологических показателей ниже нормативных значений. Кроме того, к сожалению, в России основные воспроизводственные комплексы РЯР размещены в районах с очень неблагополучной токсикологической ситуацией, что снижает количество самок, реагирующих на инъекции, ухудшает качество икры и жизнеспособность РПМ. Поэтому пока основная масса работ по испытанию Нерестинов проводится нами в экологически более благополучных регионах зарубежья.

В 2005г. в Беларуси впервые испытали препарат Нерестин-1Б (Н1Б) на ПТ и БА. Опытный рыбхоз «Селец» (директор Ю.М. Баженов, главный рыбовод А.И. Горбачев)

предоставил подробный протокол испытаний, который приведен ниже.

К пунктам этого протокола следует дать полезные всем рыборазводчикам комментарии. По п.23 - для РЯР рыб средней массой 7,3 кг при высокой t⁰ воды при первой инъекции удобнее применять Нерестин-1 вместо Н1Б и Н1А; надо использовать шприцы объемом до 2 мл с точной градуировкой без разведения препарата физ.раствором; для увеличения точности отбора проб, снижения риска передозировки и экономии препарата многие рыбоводы используют при первой инъекции даже инсулиновый шприц; доведение объема физ.раствором при первой инъекции до 1,0 мл – это из прописи для гипофизарных инъекций, мы такого не рекомендуем; внесение с физ.раствором загрязнений во флакон может нарушить стерильность препарата и дезактивировать его, а у рыб вызвать воспалительные реакции. По п.9 - совсем ошибочно дали самцам Н1Б в высокой дозе 0,4 мл/кг, т.е. вдвое больше, чем для ♀ (0,2 мл/кг), ведь полагается давать в среднем вдвое меньше, например, 0,1 мл/кг. В п. 24 указано на передозировки, которые очевидны. В п.11 средний интервал времени от последней инъекции до получения икры – 9,5 час., а должен быть не менее 11,5 час., до 13,0 час. Это указывает и на передозировки для ♀ при данной t⁰ воды. Досрочная овуляция и сопутствующие ей негативные факторы резко снижают показатели оплодотворения, развития икры, выхода, выживаемости личинок (п.20, в который обычно списывают и «естественную» убыль деловых личинок при их реализации) и увеличивают аномалии их развития (п.22), независимо от применяемых препаратов. Кроме того, по п.6 и п.19, t⁰ воды была 22-29⁰С; если инкубация икры и выдерживание личинок происходят при сильных скачках и особенно при высокой t⁰ (27,6-30⁰С), то у РЯР это всегда приводит к повышению отхода икры, количества уродств и к снижению выживаемости личинок вплоть до нулевого выхода при t⁰=30⁰C. И это тоже не зависит от типа примененного препарата.

Надо аккуратнее, точнее работать с дозами, особенно при высоких t⁰, избегать передозировок. В рыбхозе «Селец работу с РЯР, по-видимому, можно начинать раньше, при t⁰ от 20,5⁰С, и не допускать работы при t⁰ выше 27,5-28,5⁰C. Рыбоводы должны прийти к выводу, что лучше немного «недодозировать» Нерестин, особенно если инъецируют препарат данного года выпуска.

Передозировки препарата вызывают у РЯР досрочную овуляцию, и как следствие, передержку икры в теле самки до сцеживания, что является наиболее распространенной причиной неудовлетворительного качества икры и уродств личинок. Потерявшая связь с тканями и кровеносными сосудами ястыка овулировавшая икра РЯР не должна долго находится в теле самки, т.к. она требует хороших условий дыхания [1]. Запаздывание взятия икры у самки (передержка ее в рыбе) быстро ведет к снижению процента оплодотворения и выживаемости ее в процессе инкубации. Даже при относительно высоком проценте оплодотворения развитие передержанной недоброкачественной икры идет с характерными аномалиями (!). Это: аномалии набухания, аномалии оболочки икры, дробления бластодиска, желточного мешка, ложное развитие неоплодотворенной икры с ее последующей массовой гибелью, водянка зародышей, в результате которой вышедшие из оболочки икры зародыши не способны нормально плавать и скапливаются в нижней части инкубационного аппарата (то же самое бывает при нарушении условий инкубации, особенно при скачках t⁰ и ее высоких значениях), а также деформация тела зародышей [1]. Аналогичные нарушения при передозировках и досрочной овуляции отмечались ранее и в других регионах при первом опыте применения Нерестина для РЯР, а, кроме того, и в ряде случаев с осетровыми рыбами после введения Нерестина-5 и его аналогов, с карпом после инъекций Нерестина-4 и особенно Нерестина-6(6А).

Во всех инструкциях и статьях мы отмечаем, что рыбоводам надо научиться в начале работы точно подбирать дозы препарата для инъекций в зависимости как от t⁰ воды с учетом ее изменений, так и от многих других местных условий, и избегать передозировок. Дозы Нерестина и схемы его введения зависят не только от t⁰ воды и ее изменений в предшествующем сезоне (градусо-дни) и в пред- и послеинъекционном периоде (градусо-часы), но и от степени зрелости производителей и исходной гетерогенности икры, от условий созревания рыб, их здоровья, кормления и преднерестовой подготовки, периода инъецирования в ходе нерестового сезона (до сезона, в его начале, середине и в конце), кислородного, гидрохимического режима, экологии региона, наличия и концентрации в воде ихтио- и эмбриотоксикантов, от различной степени толерантности к ним рыб местной селекции или, напротив, сенсибилизации недавно завезенной породистой элиты, от породы, возраста, размера, упитанности рыб, соотношения массы рыб и массы гонад, плотности посадки рыб и способов послеинъекционного выдерживания, перепадов атмосферного давления, свето/темнового режима, времени суток инъецирования и его соответствия физиологии рыб, планируемого срока получения половых продуктов, от грамотности и опытности персонала инкубцехов, бережности работы с рыбой и т.д. В основном передозировки на местах возникают из-за недостатка опыта у рыбоводов и «психологического клина», недоверия к Нерестину и, «дабы мало не показалось», подспудного желания дать его немного больше, чтобы наверняка получить икру. С другой стороны, эти экспериментальные препараты постоянно нами совершенствуются для увеличения их эффективности, специфичности, надежности, срока годности и устойчивости к разным условиям хранения и применения. А это из года в год неизбежно влечет за собой постепенное увеличение активности препаратов, т.е. снижение реально действующих в данных условиях доз (в мл/кг массы рыб), что рыбоводы также должны учитывать, приступая к инъекциям.

В целом, первый опыт воспроизводства растительноядных толстолобика и амура в Беларуси по новой технологии с применением Нерестина удачен и экономически целесообразен. Отклонения полученных значений от нормативов при работе с новым препаратом к его недостаткам отнести нельзя, т.к. они возникают при тех же неоптимальных условиях (передозировки, высокая t⁰), что и при гипофизарных инъекциях, хорошо были ранее известны и подробно описаны в специальной литературе.

Следует отметить (таблица) достаточно высокие показатели количества созревших после инъекций самок и самцов (п.10), процентов оплодотворения икры (п.17) и, особенно, послеинкубационного вылупления личинок (п.18). Это может указывать на относительное благополучие в 2005 году эколого-токсикологической, в т.ч. радиоэкологической ситуации в Брестском регионе Беларуси по примененному в данной работе чувствительному и интегральному биологическому тесту.

Автор благодарен руководству и сотрудникам ОАО «Опытный рыбхоз «Селец» за проведение испытаний и предоставление подробного отчета о полученных результатах.

Литература

1. Мамонтов, Ю.П. [и др.]. Искусственное воспроизводство промысловых рыб во внутренних водоемах России. - СПб. : ГосНИОРХ, 2000. : 146-158 с.

2. Багров, А.М. [и др.]. Руководство по биотехнике разведения и выращивания дальневосточных растительноядных рыб. / Под ред. Проф. В.К. Виноградова. - М. : ВНИИПРХ, 2000. - 212 с.

3. Нерестин. / В сб. : Материалы международной научно-практической конференции «Аквакультура и интегрированные технологии: проблемы и возможности». - М., 2005. - 2 т. ; 74-80 с.

4. Применение препарата Нерестин-1 (1А, 1Б) для стимуляции овуляции и спермиации у растительноядных рыб. Там же, 81-86 с.

5. Новая технология искусственного воспроизводства рыб. / В сб. : Материалы научно-практической конференции «Биотехнология-2005». - Наукоград Пущино : ЗАО «А-Принт», 2005. : 84-88 с.

Дополнение к статье. - В факс-письме от 20.02.06г. гл. специалист (рыбовод-селекционер) отделения "Белозерск" рыбхоза "Селец" Ю.Н.Мелех внес уточнения и дополнения к Протоколу.

1. Самцам давали 0.14 мл/кг вместо ошибочно указанных 0.4. Но в этом рыбхозе самцы пестрого толстолобика даже при двукратной предварительной инъекции гипофиза плохо "доились", поэтому как при гипофизарных, так и при нерестиновых инъекциях стали применять дробное введение самцам (как и самкам), и результаты резко улучшились.

2. Из-за невозможности регулировки температуры воды в инкубцехе ее колебания были весьма ощутимыми, это и сказалось на снижении интервала времени от последнего укола до созревания производителей и в дальнейшем на качестве икры и личинок.

3. Помутнения глаз и воспалительных процессов у производителей РЯР после введения Нерестина не наблюдалось.

4. Отход производителей РЯР был в пределах нормы, наблюдался только после вывоза отработавших рыб в пруды в течение 1-2 недель.

Кроме того, гл. рыбовод рыбхоза А.И.Горбачев подтвердил, что рыбхоз "Селец" и Брестский регион благополучны в эколого-токсикологическом и радиационном плане. Выражена надежда на дальнейшее сотрудничество и на расширение применения Нерестина, направлена заявка на 2006 год."