Основные результаты испытаний препаратов серии "Нерестин" при искусственном воспроизводстве рыб в 2006 году

«Основные результаты испытаний препаратов серии «Нерестин»

при искусственном воспроизводстве рыб в 2006 году».

Коваленко В.А., Лисник Д.П., Никишкин И.В., Рачек Е.И., Ведрашко А.И..

Институт Фундаментальных Проблем Биологии, ул. Институтская дом 2

Лаборатория аквакультуры Южного Подмосковья

Институт рыбного хозяйства УААН, г. Киев, Украина;

ИП «Русс» (рыбхоз «Згурица»), Молдова;

Беловское рыбное хозяйство, Кемеровская обл., Россия;

Лаборатория рыбоводства ТИНРО-Центр, г. Владивосток, Россия;

Научно-исследовательская рыбохозяйственная станция (НИРХС), г. Кишинев, Молдова.

В 2006 году проблемная лаборатория аквакультуры Пущинского госуниверситета передала по договорам для научно-исследовательских работ (НИР) и научно-производственных испытаний (НПИ) организациям, предприятиям и хозяйствам разных регионов России, ближнего и дальнего зарубежья около 55000 доз различных модификаций экспериментальных препаратов серии «Нерестин» (Н1, 1Б, 1А, Н4, Н5, 5А, 5Б, Н6, 6А, Н7, 7А). Исходя из усредненных расчетных показателей, этого количества препаратов могло бы хватить для производства не менее 2,5 млрд. деловых личинок разных видов рыб, в основном растительноядных пестрого (ПТ) и белого (БТ) толстолобиков, белого амура (БА) и карпов разных пород. Если бы все хозяйства, работавшие с нами по договорам о НИР и НПИ, оформили и передали протоколы испытаний препаратов, предусмотренные договором, на этом большом материале можно было бы дать объемную и детальную статистику как по видам рыб, так и по модификациям препаратов. Но только не более четверти хозяйств «затруднили» себя составлением указанных протоколов, остальные предпочли получить чистый экономический эффект и хороший производственный результат при сохранении своих фирменных «ноу-хау» в применении препаратов без обратной связи с их научными разработчиками. Это хорошо лишь тем, что может свидетельствовать об отсутствии негативных результатов, как и в прошлые годы. Иначе красноречивым молчанием заказчиков дело бы не ограничилось (все известные нам по этому году осложнения и погрешности в работе с Нерестином приведены в данной статье). Некоторые организации, как например ФГУ «Хакасрыбвод» Красноярского края РФ, просто не смогли выполнить намеченные НПИ по объективным причинам. Там не провели испытания Н5А на осетровых ввиду того, что в 2006 г квоты на вылов производителей осетровых рыб в реке Енисей для Хакассии были выделены с большим опозданием, что совпало с окончанием нереста и не позволило из улова выбрать доброкачественных ♀ для воспроизводства.

Поэтому здесь мы вынуждены выбрать форму представления материала, основанную на оригинальных подробных данных из отчетов конкретных хозяйств. Эти «отчеты обучающихся для сомневающихся» полезны тем, что сохраняется возможность отражения деталей и специфики в технике применения препаратов в зависимости от сильно вариабельных условий (зона рыбоводства, тип хозяйства, климатические условия, температурный режим, гидрохимия, вид, порода и возраст рыб, наличие опыта и желания работы с Нерестином и др.). Статистическая обработка результатов привела бы к нивелированию уникальных данных, утере важных тонкостей и «обезличиванию» исходных условий.

Поэтому далее мы изложим, максимально приближенно к полученным отчетам, новый оригинальный материал. Он перегружен цифрами и терминами, часть из которых общепринято сокращена до символов. Комментарии и обобщения даны только в ряде безусловно необходимых случаев, а самые полезные и интересные вопросы и выводы из этого материала еще предстоит сделать. Тем не менее, этот материал необходимо знать и уметь использовать в работе рыборазводчикам и специалистам инкубцехов рыбоводных предприятий.

СПК рыбколхоз «Шапариевский» Краснодарского края, Россия (председатель Е.П. Курячий, гл. рыбовод В.В. Кривохижин) находится в VII зоне рыбоводства и уже много лет воспроизводит БТ, ПТ и БА с применением Нерестина. В 2006 году там применили Н1А на 249 ♀ БТ средней массой (Мср.) 4,9 кг и 226 ♂ массой 4,2 кг, 42 ♀ ПТ (9,5 кг) и 63 ♂ (6,2 кг), 34 ♀ БА (8,3 кг) и 26 ♂ (5,6 кг), а также Н4 на 14♀ и 14 ♂ карпа (4,8 – 8,9 кг). Нерестовая кампания РЯР начата 25.05.06г. при t⁰ воды 22,5⁰С утром и 25⁰С вечером и завершена 09.06.06г (при t⁰ 23⁰С утром и 25,5⁰С вечером). Однако в период с 04.06. по 08.06.06 t⁰ воды несколько поднялась: 24⁰С - 26,5⁰С. Общее состояние производителей – удовлетворительное, рО₂ = 5,8, рН = 7,6. Предварительную инъекцию Н1А (20% от общей дозы (ОД) 0,23 мл/кг) делали в 7.30 утра, разрешающую (80%) – в 8.30 утра следующего дня, с интервалом 25 час. ♂ давали только 1/3 от ОД, даваемой ♀, а именно 0,07 мл/кг (рекомендуемый нами диапазон – от 1/3 до1/2, в зависимости от условий), за 1 час. до разрешающей инъекции ♀. Созрело 92% ♀ и 95% ♂ в среднем через 8,5 час. При данной t⁰ воды (выше 21,5⁰) обычно применяют интервал между инъекциями 12 час. и дозу (Д) препарата подбирают так, чтобы овуляция у РЯР происходила не ранее 10,5 час., до 13,0 час. после второй инъекции. Но в «Шапариевском» при t⁰=22,5-24⁰С (утром) и 25,5-26,5⁰С (вечером) применили интервал 24 час., и этим можно объяснить необычно интересный факт «досрочной» (8,5 час.) овуляции при сохранении хорошего качества икры. После аккуратно дозированной 1-ой инъекции гонады в течение 24-х час., вероятно, полноценнее «созревают» и, поэтому, требуется меньше времени для качественной овуляции после второй инъекции. Расчет показывает, что усредненная ОД Н1А для ♀ и ♂ составила 0,15 мл/кг при отпускном номинале 0,25 мл/кг (флакон Н1А емк. 20(+1) мл содержит 80 доз). Таким образом, одного флакона Н1А здесь хватало почти на 140 кг веса производителей, а не на 80 кг, что давало ощутимую экономию уже на стадии инъекций. Цена ОД Н1А, с учетом некоторой скидки для этого хозяйства, составила 9руб.90коп. в расчете на 1 кг массы производителей (по договору о НИР расчетная цена 1 дозы Н1А – 19р.25к.) или 63р.86к. на каждого производителя ПТ, БТ и БА с Мср.= 6,45 кг. От ♀ получили в среднем по 600-800г икры и от ♂ по 3-5 мл спермы хороших качеств, со средней общей рабочей плодовитостью самок 500тыс.шт. икринок (300-700 тыс.шт.). Применяли естественный нерест стимулированных Нерестином рыб в круглом циркуляционном бассейне. Несмотря на «досрочные» овуляцию и спермиацию, процент оплодотворения икры составил 90%, личинок вылупилось из оплодотворенной икры 92% через 26-30 час. инкубации при 22-23⁰С, а через трое суток из них выжило 95%. Итого суммарные потери от полученной икры до деловых личинок составили только 23% с высоким выходом 77%. Аномалий развития икры, личинок и мальков не отмечено. Нерест РЯР в этом хозяйстве с гипофизом уже давно не проводят, работают только с Нерестином. Руководство «Шапариевского» особо отмечает высокое качество препарата Нерестин и своевременность, оперативность его поставок. В 2006 году в хозяйстве получено 120 млн. шт. деловых личинок РЯР при средней цене реализации 12тыс.руб. за 1 млн.шт., (т.е. произведено личинок на 1.44 млн. руб.) а экономический эффект применения Нерестина только по сравнению с возможными затратами на гипофиз по скромной оценке составил до 15000 руб. при общей массе инъецированных производителей РЯР 4070 кг. В хозяйстве также провели первые для себя положительные испытания Н4 на карпе и намерены продолжить работу с Н4 в 2007 году.

В Цюрюпинском нерестово-вырастном рыбном хозяйстве ОАО «Херсонрыбхоз», Украина (председатель правления Е.В. Пеньковский, гл.рыбовод ВИ. Саркисян, селекционер-рыбовод В.Л.Дмитриев), где имеют двухлетний опыт апробации Нерестинов, определили оптимальные ОД препаратов для своих условий и получили в 2006 году практически хорошие результаты. Хозяйство относится к VI зоне рыбоводства и воспроизводит РЯР и карпа в условиях нерегулируемого режима t⁰ воды. Работали с БТ - 80 ♀ (4,0-8,0 кг, Мср.= 6,0), 80 ♂ (3,0-6,0 кг, Мср.= 4,5 кг), с ПТ - 50 ♀ (9,0 – 15,0 кг, Мср.= 12,0), 50 ♂ (7,0-11,0 кг, Мср.= 9,0), с БА - 80 ♀ (6,0-10,0 кг, Мср.= 8,0), 80 ♂ (4,5-7,5 кг, Мср.= 6,0) и с карпом украинских пород, 35 ♀ (5,0-9,0 кг, Мср.= 7,0), 35 ♂ (4,0-7,0 кг, Мср.= 5,5). В испытания брали здоровых рыб без травм при средней t⁰ воды 23⁰С, но с колебаниями от 20⁰С до 26⁰С, т. к. инкубцех не имеет регулируемого режима t⁰. рН = 7.7, перманганатная окисляемость = 12 мг/л, наличие токсикантов в воде не определялось. Для РЯР ОД препаратов Н1 и Н1А, согласно представленного отчета, были заметно увеличены из-за того, что к началу инкубации производители не набрали необходимой суммы тепла (градусо-дней) для созревания из-за сильных зимних морозов и холодной затяжной весны. ОД для ♀ в данном рыбхозе составили: для БТ – 0,6-0,8 мл/кг Н1 или 0,3-0,4 мл/кг Н1А, для ПТ – 0,75-1,0 мл/кг Н1А, для БА – 0,45-0,6 мл/кг Н1А. Но для ♀ карпа примененные ОД соответствовали инструкции: Н6 – 0,5 мл/кг и Н6А – 0,25 мл/кг. Для ♂ ОД составили: БТ – от 0,23-0,3 до 0,1 – 0,13 мл/кг Н1А (ОД ср.= 0,19), ПТ – от 0,56-0,75 до 0,25-0.33 мл/кг Н1А (ОД ср.=0,47), БА – от 0,34-0,45 до 0,15-0,2 мл/кг Н1А (ОД ср.=0,29), карп – от 0,37 до 0,16 мл/кг Н6 (ОД ср.=0,26) и от 0,19 до 0,08 мл/кг Н6А (ОД ср.=0,14). Согласно инструкциям к применению препаратов, интервал времени между инъекциями при двукратном введении составил в начале инкубации – 24 час., затем был снижен до 12 час., а соотношение Д при первом и втором введении варьировало от 30%+70% в начале сезона до 20%+80% в середине и в конце. Итого для РЯР усредненный для ♀ и ♂ расход Н1А составил: БТ – 0,27 мл/кг, ПТ – 0,67 мл/кг, БА – 0,41 мл/кг, что для ПТ и БА оказалось существенно выше номинальных значений расхода препарата для средней t⁰=23⁰С, а для карпа – 0,33 мл/кг Н6 и 0,23 мл/кг Н6А, что ниже номиналов 0,5 мл/кг для Н6 и 0,25 мл/кг для Н6А. Следует отметить, что это единственный за последние годы известный нам случай заметного превышения декларируемого расхода Н1 и Н1А по отношению к номиналу, указанному на флаконах с препаратом, и связан этот случай, по-видимому, как и с известной климатической аномалией, так и с неизвестной нам спецификой данного хозяйства. В результате инъекций Нерестина созрело: 90% ♀ и 88% ♂ БТ, 95% ♀ и 92% ♂ ПТ, 93% ♀ и 91% ♂ БА, 94% ♀ и 92% ♂ карпа, т.е. получены достаточно высокие для неблагоприятных условий, не ниже нормативных значений показатели овуляции и спермиации. Интервал времени для РЯР от последней инъекции ♀ до получения икры при t⁰=20-22⁰C составил 14-18 час., а при t⁰=22,5-26⁰C – 12 час., что также соответствует ожидаемым оптимальным интервалам и свидетельствует об отсутствии передозировок препарата. При этом от ♀ БТ было получено в среднем 0,6 (0,5-0,7) кг икры, от ПТ – 1,65 (1,5-1,8) кг, от БА – 1,0 (0,7-1,3) кг и от карпа – 1,25 (1,0-1,5) кг, что соответствует норме или даже превышает ее. При визуально нормативном качестве половых продуктов ♀ и ♂ и сухом способе оплодотворения процент оплодотворения икры варьировал от 83 до 87%, а процент вылупившихся предличинок по отношению ко всей отцеженной икре составил: БТ – 55-60%, ПТ – 65-70%, БА – 60-66%, карп – 60-65%. Через трое суток в итоге было получено (выжило) 69-72% деловых личинок РЯР и 70-75% карпа, что не очень существенно уступает нормативным значениям при имевших место неоптимальных условиях. Аномалии развития икры, личинок и мальков не превысили 5-10%. Специалисты хозяйства отметили, что из-за нерегулируемого температурного режима Нерестины старались применять только в случаях, когда t⁰ воды стабилизировалась или незначительно возрастала (на 20% производителей), а в остальное время использовали гипофиз (на 80% производителей). Проведенный специалистами анализ работ показал, что в целом различные модификации испытуемого препарата Нерестин хорошо себя проявили, особенно на карпе. Они очень удобны в работе, выход деловых личинок из икры повышен (!), ♀ созревают в основном одновременно и полнее отдают икру, значительно меньше тромбированных ♀ и отход производителей после инкубации. Специалисты «Херсонрыбхоза» считают, что имеющиеся инструкции по Нерестину разработаны для воспроизводства рыб в условиях регулируемой t⁰ воды (это не совсем так), поэтому основные затруднения были связаны с подбором доз в условиях нерегулируемой t⁰. Было предложено разработать инструкцию по применению Нерестинов при инкубации карпа и РЯР для инкубцехов с нерегулируемым режимом t⁰. Это нами принимается, но не в плане новой разработки, а в плане доработки существующих инструкций.

В ОАО «Донрыбкомбинат» Донецкой обл. Украины (председатель правления П.В. Андриишин, зам. председателя – гл.рыбовод А.В. Кулиш, инженер по селекционной работе Г.И. Бондар) в 2006 году продолжили начатую еще в 90-х годах производственную проверку на РЯР препаратов Н1А и Н1Б, ранее практически отказавшись от применения гипофиза. Работу проводили на рыбучастке «СлавГРЭС» рыбхоза «Красная Долина» в V зоне рыбоводства. Использовали: 7 партий БТ, всего 330 ♀ и 124 ♂ Мср.= 5,0 (3,5-7,0); 4 партии ПТ, всего 100 ♀ и 130 ♂ Мср.= 9.5 кг (8,0-13.0); 5 партий БА, всего 148 ♀ и 70 ♂ Мср.= 7,0 кг (5,0-8,5); итого 902 производителя общим весом около 6000 кг. Общее состояние производителей отмечено как удовлетворительное. Гидрохимия по общим показателям в основном соответствовала ОСТ: рН = 8,5, средняя пермарганатная окисляемость = 12,7 мг О₂, БПК₅ = 4,5 мг О₂, щелочность = 5,8 мг/экв., нитраты – до 0,9 мг/л, но ионы аммония – до 0,14 мг/л. Наличие токсикантов в воде не определялось. При средней t⁰ воды = 25,5⁰С (колебания в пределах 23-27,5⁰С) примененные ОД Н1Б и Н1А соответствовали рекомендованным по расчетному графику «Д -t⁰» из Инструкции к препарату. Препараты вводи двукратно с интервалом 12 час. с соотношением Д 20%+80% для ♀, а ♂ получали 50% от ОД для ♀. Со 2-ой половины инкубации все Д сократили на 10-20% по сравнению с начальными. В разных партиях созрело производителей: БТ – от 75% до 97% (средн. 88%), ПТ – от 76 до 95% (средн. 86%), БА – от 60 до 80% (средн. 72%). При t⁰ = 25-27⁰С икру получали через 7-8 час. после второй инъекции. Этот слишком краткий интервал времени до овуляции (досрочная овуляция) может свидетельствовать об имевших место небольших передозировках препаратов при 12-тичасовом интервале между инъекциями, что не могло не вызвать некоторую деоптимизацию качества икры, хотя визуальное качество половых продуктов было хорошим. В среднем получено от ♀ БТ по 0,6 кг икры, ПТ - 1,1 кг и БА – 0,8 кг. После полусухого оплодотворения икры его % составил 80-85% по отношению ко всей икре, вылупилось 55-60% предличинок и выжило через 3 суток 90%. Как видим, общий показатель выхода деловых личинок от исходной икры хотя и достаточно приемлемый, но заметно снижен от оптимума за счет %% оплодотворения и вылупления, а это, скорее всего, и есть следствие досрочной овуляции в результате передозировки. К тому же наблюдались кратковременные повышения t⁰ воды до 30,5⁰С из-за выхода из строя насоса подачи холодной воды, и в этом случае процент уродств развития доходил до 15% при обычных значениях до 5% (норма). Так как данное предприятие является одним из пионеров и лидеров в производственной работе с Нерестинами, и это – заслуга бывшего гл. рыбовода В.А. Коваленко, затруднений в применении препаратов у них теперь не возникает, да и вопросы и предложения отсутствуют. – Все устраивает.

Между тем от соседей предыдущего рыбохозяйственного «монстра» - из ОАО «Новомосковский рыбокомбинат» Днепропетровской обл. Украины. (V зона; директор – С.К. Павлов, гл. рыбовод – С.К. Кухаренко) поступил краткий положительный отчет об испытаниях Н1 на БА. Производители нормального физиологического состояния имели массу: ♀ - 4,6-5,8 кг, ♂ - 3,7-4,7 кг. рО₂= 6,2 мгО₂/л, рН = 7,8, перманг.окисл. = 18 мгО₂, СО₂ = 16 мг/л, нитраты = 0,2 мг/л, фосфаты = 0,8 мг/л, сульфаты = 80 мг/л. При средней t⁰ воды = 23,5⁰С (колебания от 22 до 25⁰С; во время инъекций – 22-23⁰С, при отборе икры и инкубации – до 25⁰С) применили Н1 в ОД для ♀ 0,5 мл/кг (1-ая – 0,1, 2-ая – 0,4 мл/кг), а для ♂ дали 0,3 мл/кг. И здесь ОД препарата превысила требуемые расчетные значения по графику «Д-t⁰» почти на 0,15 мл/кг для ♀ и не менее 0,1 мл/кг для ♂. Интервал времени между инъекциями (12-13.06.06 г) составил 24 час., инъекции проводили в 7³⁰ утра. Интервал времени от последней инъекции до получения икры при t⁰=25-27⁰C составил 7-8 час. (признаки передозировки и досрочной овуляции !). Оплодотворено (сухим способом) 90% икры (от ♀ получено в среднем по 0,4 кг икры хорошего качества). И через 3 сут. получено 83% деловых личинок по отношению к заложенной на инкубацию икре, а аномалии развития не превысили порога 5%. Специалисты хозяйства планируют продолжить производственную проверку препарата в 2007 году с использованием большого количества производителей.

Здесь уместно заметить, и это четко видно из приведенных выше и в наших прежних статьях результатов: Нерестин-1, 1Б,1А действуют достаточно эффективно на белом амуре, равно как и на БТ и ПТ. Бытующее в некоторых регионах и хозяйствах (например, в Узбекистане) мнение, что Нерестин неэффективен для БА, совершенно ошибочно. Причина такого мнения – в обычных консерватизме и инерции мышления, в воспоминаниях о работе на РЯР с хорионическим гонадотропином (хориогонином). Последний, действительно, был эффективен только на толстолобиках и почти бесполезен на амуре. Этот готовый гормональный препарат действует по сравнению с Нерестинами более видоспецифично и на иерархически более низких уровнях регуляции репродукции рыб. У белого амура на хориогонин, видимо, нет специфических рецепторов в гонадах.

И еще поправка, даже для профессиональных коллег. – Нерестины по структуре и механизму действия не являются ни гонадотропными, ни тем более гормональными или гормоноподобными препаратами. Если выражаться точно – это гипофизотропные (еще точнее - аденогипофизотропные) препараты, которые непосредственно действуют на гонадотропоциты аденогипофиза рыб, а не на гонады. Это весьма важное различие, имеющее еще один практически значимый результат. Последнее будет видно в конце статьи, в материалах по Молдове.

Испытания препаратов Н1, 1Б и 1А на РЯР в ОАО «Опытный рыбхоз «СЕЛЕЦ» Брестской обл. Беларуси, (III зона; гл. рыбовод А.И. Горбачев, начальник инкубцеха Ю.Н. Мелех) успешно начаты в 2005 г и полученные тогда результаты полностью отображены и обсуждены в отдельной статье (2006а). В 2006 г испытания продолжены в двух турах 06.06.06 г и 12.06.06 г на БА (50 ♀ Мср.6,9 кг, 36 ♂ 6,8 кг) и ПТ (63 ♀ 7.1 кг, 60 ♂ 6,0 кг). Самок инъецировали двукратно с интервалом 12 час. в ОД Н1А 0,19 мл/кг при t⁰=24⁰C и 0,16 мл/кг при t⁰=25⁰С (номинал – 0.25 мл/кг), а Н1Б давали в ОД 0,28 мл/кг при t⁰= 24⁰С и 0,24 мл/кг при t⁰=25⁰C (номинал – 0,33 мл/кг). Соотношение Д: 20+80%. Здесь инъецирование проводилось с существенной экономией препаратов при дозировках в среднем на 35% ниже номинала, указанного на флаконах. Специалисты рыбхоза отметили, что препараты очень удобны в работе, но требуют точности в дозировке. Предварительную инъекцию ♀ делали в 9-10 час. утра, разрешающую – в 21-22 час., а икру получали через 12,5-14 час. после второго укола при t⁰ 25-25,5⁰C в первом туре и при t⁰=26-27⁰С во втором. В 2005 г. овуляция икры у ♀ здесь происходила через 9,5 час. из-за некоторой передозировки препаратов. В первом туре ♂ инъецировали в Д 0,14 мл/кг Н1Б и 0.1 мл/кг Н1А (50% от ОД ♀), а во втором туре ♂ давали только 1/3 от ОД для ♀. Инъекции ♂ делали за 1 час. до разрешающей инъекции ♀. От ♀ БА в среднем получено по 700 г икры (10,2 % от массы рыб) и от ♂ БА - 8 мл спермы, а от ♀ ПТ – по 850 г икры (12% от массы рыб) и от ♂ по 5 мл спермы. Средняя общая рабочая плодовитость ♀ БА составила 650 тыс. шт. икринок на 1 ♀ (900 шт. икринок в 1 г), ПТ – 750 тыс. шт. (850 шт. в 1 г). Визуально качество половых продуктов было в норме. Через 20-26 час. инкубации при t⁰=25-27⁰С и 3-х суток выдерживания итоговое количество деловых личинок по отношению ко всей полученной икре составило 64% для БА при средней навеске 1,2 мг и 58% для ПТ при навеске 1,4 мг. При этом проценты овуляции, спермиации, оплодотворения, вылупления у РЯР здесь оказались выше, чем в 2005 году, но несколько уступали оптимальным значениям. Из аномалий развития икры отмечали случаи лжедробления, а у личинок – водянку и искривление позвоночника. В итоге получено 15,6 млн. шт. деловых личинок ПТ и 11,3 млн. шт. БА. Экономический эффект от применения Нерестина хозяйством оценен в 2300$ при цене реализации личинок РЯР 650$ (~17400 руб.) за 1 млн. шт. В пункте протокола испытаний «Ваши пожелания и предложения по вопросам применения Нерестина» записано: «Планируем работать и дальше». Простой расчет показывает , что применение Нерестина позволило хозяйству получить и реализовать деловых личинок РЯР на 13% больше, чем удавалось ранее в сопоставимых условиях при работе с гипофизом.

В ОАО «Назаровское рыбное хозяйство» Красноярского края РФ, (тепловодное хозяйство, II зона; ген. директор С.В. Хованский, ответств. cпециалист – С.А. Бояркин) испытали Н6, Н6А на немецком карпе и канальном соме. рО₂=6-8 мг/л, рН=7,8-7,9. Взяли 12 ♀ карпа массой 10-11 кг и 24 ♂ (7-9 кг), 10 ♀ сома (3-4,5 кг) и 10 ♂ (3-4 кг). Состояние рыб – хорошее. 05.06.06 г в 9:30 при t⁰=18-19⁰С (1-ая инъекция) и в 21:30 при t⁰= 22⁰С (2-ая) ♀ карпа с интервалом 12 час. вводили Н6 и Н6А при соотношении Д 20%+80%. Д соответствовали расчетным по графику «Д -t⁰». Для ♂ применили однократно Д 1/3 от ОД для ♂ одновременно со второй инъекцией ♀. ♀(100%) и ♂ карпа (90%) созрели через 10-12 час. (это ранее оптимального срока). Способ оплодотворения указан «естественный». Икра оплодотворена на 90%, личинок вылупилось 75% по отношению ко всей икре через 70-72 час. инкубации при t⁰=19-22⁰С и средней навеске деловых личинок >1 мг. Аномалий развития икры и личинок не отмечено. С канальным сомом работали 22-27.06.06 г. с применением Н6А. Взяли 16 ♀ Мср.=5,0 кг и 16 ♂ Мср.=5,5 кг в хорошем состоянии. При t⁰=27⁰С ♀дали Н6А двукратно с интервалом 12 час. (в 9³⁰и в 21³⁰) в ОД = 0,25 мл/кг с соотношением доз 20+80%, а ♂ вводили Н6А в ОД = 0,2 мл/кг одновременно с ♀. Созрело 100% ♀ и 80% ♂. При нересте сома возникли затруднения из-за резкого спада t⁰ воды с 27⁰С до 21,5⁰С, из-за этого нерест был сильно растянут во времени, полноценный нерест произошел не у всех пар сомов, причем некоторые ♀ перезрели, а из ♂ созрели не все. Визуально качество половых продуктов – среднее, оплодотворено 80% икры, личинок вылупилось по отношению ко всей икре – 80%, через 3 сут. выжило 70% деловых личинок. Аномалий развития икры и личинок не отмечено, а по поводу Нерестина сказано, что он удобен в работе и дает хорошие результаты. В 2006 г. в хозяйстве работали только с Нерестином без гипофизов, и получили для себя 1,7 млн. шт. деловых личинок карпа и 100 тыс. шт. канального сома.

В ООО «Беловское рыбное хозяйство» Кемеровской обл. РФ (тепловодное, II зона; директор Р.О. Кислов, гл. рыбовод О.П.Кислов, рыбовод И.В. Никишкин) испытали Н6А на немецком карпе (3 ♀ и 9 ♂) и карпе разбросанном (3 ♀ и 6 ♂). Мср. ♀ - 11,23 кг (9,75-14,0), ♂ - 8,79 кг (7,9-10,9). Состояние производителей отличное. Гидрохимия: рО₂=8,0-8,5 мг/л, рН=8,3, прозрачность-24, Аl³⁺-0,03 мг/л, Zn ²⁺- 0,009 мг/л, NO₂^—0,08 мг/л, NO₃^—1,6 мг/л, NH₄⁺-0,37 мг/л, Fe (общ.) – 0,3 мг/л, БПК – 0,5, ХПК – 10,6, Сu²⁺ - 0,007 мг/л, Р^-<0,05 мг/л, нефтепродукты – 0,3 мг/л, взвешенные вещества – 19,6 мг/л. Сl^-< 10 мг/л, фенол 0,0005 мг/л, формальдегид – 0,01 мг/л, SO^—11,1 мг/л; оксигенация воды не производилась во избежание гипероксии. Завоз рыб в цех и инъецирование – при 21⁰С, созревание – 21,5⁰С, инкубация – 22⁰С, выдерживание личинок – 21⁰С. В таких условиях 16.05.06. первую Д ♀ дали в 9³⁰, 2-ую – в 22⁰⁰, через 12,5 час. ОД Н6А применили согласно номинала на этикетке флакона – 0,25 мл/кг, соотношение Д 20+80%, а ♂ дали 2/3 от ОД для ♀ в 12³⁰, т.е. через 3 час. после первой инъекции ♀. Созрело 100% производителей обеих пород карпа, ♀ и ♂, в среднем через 10 час.49 мин. (разброс времени созревания от 9ч.15м. до 12ч.50м.). Это несколько досрочное созревание и ОД можно было снизить с учетом t⁰ воды относительно номинала. Получили в среднем 1245 г (11,1 % от массы тела) икры визуально хорошего качества со средним весом одной икринки 1,4 мг, со средней общей рабочей плодовитостью 888,3 тыс. шт. икринок на 1 самку и относительной плодовитостью 79,1 тыс. шт./кг. Оплодотворение – 81,5%, вылупилось 81,5% после инкубации в течение 69,7 час. при t⁰=22⁰С, а через 3 сут. выжило деловых личинок 76,3%. Аномалий развития икры и личинок не отмечено.

В этом рыбхозе, к сожалению, произошел типичный «прокол» с толстолобиком после введения Н1А в общей дозе 0,15 мл/кг при t⁰=27⁰C. Взяли 7 ♀ Мср.= 5,84 кг (3,2-8.5 кг) и 6 ♂ 4,85 кг (3,65-5,75) в отличном состоянии. Завоз, инъецирование и созревание рыб – при 27⁰С, инкубация икры – 24,5⁰С, выдерживание личинок – 24⁰С. Гидрохимия – та же. 08-09.06.06г. ♀ инъецировали двукратно с соотношением Д 20%+80% и интервалом 12 час. (1-ая инъекция в 20⁰⁰, 2-ая – в 8⁰⁰). Через 1 час. после предварительной инъекции ♀ дали 1/2 от ОД (0,075 мл/кг) самцам. Созрело только 57,1% рыб в среднем через 7 час.13мин. (от 7⁰² до 7²⁴) после разрешающей инъекции. Для 12-ти часового интервала это крайне досрочное созревание с обязательно получаемым крайне низким качеством икры. Так и вышло. – среднее количество икры – 1139 г/♀, общая рабочая плодовитость – 949,2 тыс.шт./ ♀, относительная – 140,1 тыс.шт./кг, средний вес 1 икринки – 1,2мг, и визуально качество половых продуктов было хорошим. Но далее… При хорошем оплодотворении икры (90%) вылупилось личинок только 50% по отношению ко всей икре (инкубация длилась 25 час.), а через 3 сут. выжило всего 4%. Было отмечено большое количество уродств в эмбриогенезе, высокий отход при выклеве и во время выдерживания. Если исключить отмеченную нами ранее (Мотлох, 2005) возможность высокого токсического фона воды в этом хозяйстве, то с учетом теплых вод можно предположить следующее. – РЯР, особенно крупные, до нерестовой кампании получают завышенное количество градусо-дней и перезревают. Такое происходит и на обычной воде, если весеннему нересту предшествовала затяжная теплая осень и/или теплая зима. В этом случае на стимуляцию как гипофизом, так и Нерестином отзывается резко сниженное число перезревших производителей ввиду начавшейся в их теле резорбции половых продуктов, а те особи, которые все-таки реагируют на инъекции, дают половые продукты очень низкого качества. К тому же для таких рыб слишком велика вероятность передозировки, если исходить (без необходимых поправок на состояние рыб) напрямую из цифр, рекомендуемых графиком «Д -t⁰». Совершенно аналогичные случаи наблюдают в любом хозяйстве на обычной воде в конце нерестового периода при высоких t⁰ воды и перезревании последних партий РЯР.

И в этом же хозяйстве апробировали препарат Н5кс на канальном соме. Взяли 10 ♀ Мср.= 7,4 кг (5,8-9,0) и 6 ♂ 7,2 кг (5,7-9,8 кг) отличного состояния. Работу проводили при той же гидрохимии, но с оксигенацией воды до рО₂=12-15 мг/л. Н5кс в ОД 1,0 мл/кг вводили ♀ трижды с интервалом 24 час., с 20.02 по 22.02.06 ежедневно в 10-11 час. утра. Соотношение доз: 20+30+50%. Самцам давали Н5кс в общей Д 0,5 мл/кг дважды (20+80%), после 2-ой и 3-ей инъекций ♀. Созрело 90% ♀ и лишь 33% ♂. 2 ♀ отнерестились после первой инъекции, когда ♂ еще не инъецировались; получено 44 тыс.шт. личинок. 1 ♀ отнерестилась после второго укола, а самец получил 20% от расчетной дозы; кладка была плохо оплодотворена – 2,5 тыс.шт. личинок. 1 ♀ отнерестилась после 3-ей инъекции, а ♂ получил расчетную дозу; получено 20 тыс.шт. личинок. По результатам взвешивания до и после нереста среднее количество икры составило 1600г/самку. Общая средняя рабочая плодовитость – 437,2 тыс.шт./ ♀, относительная – 93,0 тыс.шт./ 1 кг массы ♀, средний вес 1 икринки – 15-20 мг (самки разного возраста). Итого 4 кладки были хорошо сформированы и 3 из них хорошо оплодотворены. Всего получено 66,8 тыс.шт. вылупившихся личинок. Основное возникшее затруднение: 8 ♀ из 10-ти инъецированных или выметали икру и создали кладки (4 шт.) или текли (4 шт.), но пассивные ♀ не приступали к оплодотворению. Здесь можно предположить, что для неоднородных ♀ канального сома следовало бы скорректировать ОД Н5кс в сторону уменьшения в зависимости от степени их исходной готовности, а для ♂, наоборот, увеличить до ОД, даваемой ♀ (если еще не выше), и колоть так же дробно, как и ♀. Примерно аналогичная ситуация с канальным сомом уже выше изложена (Назаровский рыбхоз), но там применен совершенно иной препарат Н6А, и был резкий спад t⁰ воды при нересте сомов. Аналогия с ♂ сома (сом Солдатова) возникла и в Приморье (см. ниже). Тем не менее эти результаты исключительно интересны и авторы надеются на продолжение испытаний и отработки техники применения Нерестинов на канальном соме в этих и других хозяйствах.

Лаборатория рыбоводства ФГУП «ТИНРО-Центр» г. Владивостока РФ (зав.лаб. Е.И. Рачек) на базе полносистемной тепловодной Лучегорской НИРС (III зона) уже несколько лет проводит испытания Нерестинов на разных видах рыб. 11.06.06г из садков с t⁰=19⁰C принесли в бассейны инкубцеха на t⁰=24⁰С дальневосточного окуня-ауху (китайского окуня), 2 ♀ Мср.= 4,25 кг (4,2-4,3 кг) и 4 ♂ 4,0 кг (3,7-4,7 кг). Состояние производителей - отличное. рО₂= 6,8-7,7, рН=7,0-7,2. Препаратом Н6 рыбам сделали инъекции одноразово в 18²⁰ вечера в Д 0,5 мл/кг для ♀ и 0,25 мл/кг – для ♂; двух хорошо текучих ♂ не инъецировали. Созрело 100% производителей. От ♀ 4.2 кг получена отличная икра через 25 час. 20 мин., от ♀ 4,3 кг – через 26час. 40мин. В среднем от одной ♀ получено 1183 г набухшей икры. Общая рабочая плодовитость ♀ составила 212 тыс.шт. икринок/ 1 ♀, относительная – 50 тыс. шт./кг при Мср. 1 икринки 5,62 мг. При t⁰=23-25⁰C естественный (стимулированный Нерестином) нерест в проточных бассейнах на течении дал 100% оплодотворения икры. Личинок по отношению ко всей икре вылупилось 88,1%; инкубация шла при t⁰=20,5⁰C. Через 55 час. наблюдали начало вылупления личинок и через 164 час. – завершение. Через 3 сут. выжило 90% деловых личинок. Растянутое во времени вылупление связано с резким понижением t⁰ при переходе на прямоточное водоснабжение. Всего с Н6 в Лучегорске получено 330 тыс.шт. деловых личинок окуня-аухи.

05.06.06г. в 9⁰⁰ из садков с t⁰=18⁰С перенесли в бассейны на 20,5⁰С 3 экз. амурского эндемика – сома Солдатова, 2 ♀, 4,4 и 8,95 кг, и 1 ♂, 4,1 кг. рО₂=7,2-7,7, рН=7,0-7,2. Через 1 час. ♀ сделали первую инъекцию Н6 и через 10 час. в 20:00 – вторую, при t⁰=20,5⁰С. ОД Н6 для ♀ - 0,5 мл/кг, соотношение Д – 25%+75%. ♂ инъецировали тоже дважды, одновременно с ♀, в ОД 0,4 мл/кг (25%+75%). При созревании и нересте t⁰=23,4-24⁰С. Все рыбы созрели, но у ♂ созревание недостаточное, он был малоактивен. Из-за этого оплодотворение икры и дальнейшее развитие были крайне низкими. Обычно, при нересте сомов, к 1 ♀ подсаживают 2 или несколько ♂. А здесь просто перепутали ♂ и ♀: считали, что взяли 1 крупную ♀ и 2-х ♂, а оказалось наоборот. Со дна бассейнов собрали ~400 мл. икры на 99,9% неоплодотворенной, и далее от ♀ сцедили еще 180 мл резорбированной икры, средней массой 4,3 мг. Через 96 час. инкубации с понижением t⁰ до 21,2⁰С из всего-навсего 10 вылупившихся личинок выжило 8 шт., из которых к концу августа 2006г. выращено 8 сеголетков сома Солдатова ~ по 240 г. К середине октября все сеголетки выжили, их средняя масса составила 700 г. Это – успех! Сделано предположение, что для ♂ сома Солдатова доза Н6 должна быть в 1,3-1,5 раза больше, чем для ♀ сома. Вероятно, это предложение Е.И. Рачека может иметь отношение и к канальному сому, но надо проверять и дальше.

Несмотря на накладки, полученные в ТИНРО-Центре на Лучегорской базе данные по репродукции окуня-аухи и сома Солдатова с применением Н6 уникальны и имеют пионерское значение для последующей разработки технологии искусственного воспроизводства как именно этих, так и других видов рыб отрядов окунеобразных и сомообразных.

Этот же препарат Н6 в период с 08.05 по 13.06.06г в Лучегорске испытали на 3-х производителях немецкого карпа и 13 экз. амурского сазана. ♀ получали Н6 в номинальной Д (как на этикетке флакона) 0,5 мл/кг двукратно (20+80%) с интервалом 12 час., ♂ - однократно по номиналу 1/2 от ОД ♀ 0,25 мл/кг, одновременно с разрешающей инъекцией для ♀. Созрели практически все производители (у одной ♀ сазана обнаружен тромб), но созревание ♀ началось досрочно (это опять-таки признаки передозировки, т.к. при инъекциях и созревании t⁰воды была 20-23⁰С ). По графику «Д -t⁰» следовало давать для ♀ ОД Н6 не выше 0,3 мл/кг). Все ♂ давали большой объем эякулятна (12-25 мл), а ♀ сазана c Мср. 3,7 кг – по 380-460 г икры в среднем по двум партиям, ♀ карпа массой 14,2 кг – 1215 г икры. Общая рабочая плодовитость ♀ сазана составила в среднем 370 тыс. икринок/♀, карпа – 1004 тыс. шт., относительная для сазана – 100 тыс.шт./кг, для карпа – 70,7 тыс.шт./кг. Часть икры немецкого карпа до измерений потеряна в садке из-за «буйного» поведения ♀ при созревании. Мср. икринок карпа – 1,21 мг, сазана – 1,14 мг. При визуально хорошем качестве половых продуктов и инкубации в аппаратах Вейса при t⁰=19,5-21,6⁰С оплодотворение икры составило ~90%, через 77-88 час. (крайний разброс по всем рыбам и партиям) при t⁰=19,5-23,5⁰C вылупилось в среднем >80% личинок по отношению ко всей икре, а через 3 сут. выжило 95% деловых личинок при средней навеске 2 мг. Аномалии развития икры и личинок – единичные. По-видимому, здесь при инъекциях рыбам заносили инфекцию, т.к. через некоторое время в месте укола наблюдали потемнение кожи, затем даже опухоли с выделением гноя (все модификации Нерестина поставляются только в стерильной форме). Особенности тепловодных хозяйств и обычных рыбхозов IV-VII зон как раз в том и заключаются, что в них существуют более благоприятные условия для латентных и легко активируемых форм инфекций и инвазий. В таких рыбхозах при инъекциях надо соблюдать обычные в зоотехнике меры профилактики типа предварительной дезинфекции места укола хотя бы ваткой с тройным одеколоном, а после укола обтертую поверхность надо смазать каплей БФ; либо как это принято при инъекциях нестерильной суспензии гипофиза, надо добавлять простой антибиотик бензилпеницилин из расчета 5000 ед./кг. Всего в 2006 г. в Лучегорске получено (от 9 ♀) 2,03 млн. деловых личинок карпа и сазана при цене реализации 25000 руб./млн., т.е. вдвое более высокой, чем, например, в Ростовской обл. и Краснодарском крае. Часть личинок сазана пустили на кормление молоди окуня-аухи и сомов Солдатова.

Наконец, здесь (родной для РЯР ДВ-регион) попытались работать с Н1Б и на ПТ. 2 ♀ Мср.= 10 кг и 2 ♂ Мср.=7,23 кг хорошего состояния выдерживали, инъецировали (20,8⁰С) и «нерестили» (20,6⁰С) в садках. 27.06.06 г. в 12час. дня и через 13 час. в 01 час. ночи ♀ дали инъекции (20%+80%) в общей дозе 0,33 мл/кг, а ♂ ввели 0,17 мл/кг Н1Б сразу после второй инъекции ♀. Все по номиналу. И ♂ и ♀ все созрели. Через 12 час. 20 мин. икры хорошего качества получено в среднем 1293г (12,9% от массы тела ♀), а спермы от ♂ - 6-10 мл, но среднего качества, с кровью. Общая рабочая плодовитость ♀- 693 тыс. икринок, относительная – 69,3 тыс.шт. при Мср. икринки = 1,85 мг. Сухой способ оплодотворения дал 85% пользы, вылупилось 70% (инкубация при 20,6-21,6⁰С, но вылупление было растянуто во времени – 50-95 час., и завершилось при скачке t⁰ до 26⁰С). А через 3 сут. выжило 58% деловых личинок от полученной икры, с Мср. личинки - 3,8-4,0 мг. Аномалии развития превысили норматив, часть личинок не встала на плав. Затруднения: малый объем и низкое качество спермы у ПТ. Заметим повторно, что именно с ПТ (но не с БА и с БТ) аналогичные проблемы иногда возникают и в других хозяйствах. Возможно, это есть следствие гибридизации рыб либо особенностей тепловодных хозяйств, где производители часто перезревают, либо обычных хозяйств IV – VII зон в конце сезона инкубации, особенно в конце июня – начале июля. Всего здесь при апробации Н1Б получили 540 тыс.шт. деловых личинок ПТ, а цена их реализации в регионе была 30000 руб./млн.шт., т.е., например, в 2,5 раза выше, чем в Ростовской обл. и в Краснодарском крае. Если 120 млн. деловых личинок только одного р/к «Шапариевского» сделать на ДВ - родине РЯР в Лучегорске, да по Приморским ценам продать, то «ТИНРО-Центр» может только за июнь самостоятельно заработать 2,16 млн. руб. - На разнице в ценах, в конвертируемых руб.! Есть смысл на Дальнем Востоке воспроизводить дальневосточных аборигенов - РЯР?

Перенесем взор на Запад. - Успехи в экспериментальном применении Н5 на стерляди в Украине уже изложены также текстово, как и здесь, в свежей статье данного журнала (Кулиш, Коваленко, 2006). Здесь мы даем для наглядности обобщающую таблицу 1 всех полученных на 99 производителей стерляди результатов «Донрыбкомбината». Таблица, с учетом опубликованной статьи, в комментариях не нуждается. А все возможные погрешности и пути их устранения в цитированной статье есть.

Таблица 1. Первый опыт производственного испытания в Украине препарата «Нерестин-5» при воспроизводстве стерляди.

Таблица 1

В Румынии в 2006г искусственное воспроизводство осетровых реки Дуная осуществлялось с участием сотрудника Кишиневской НИРХС А.И. Ведрашко в научно-исследовательском Центре по рыбоводству, рыболовству и переработке рыбы, г. Галац (работы на севрюге проводились на экспериментальной базе «Братиш Мик»); в частной фирме «Кавиар Хаус» (воспроизводительный комплекс «Исакча», работы на белуге, севрюге, стерляди); а акционерном предприятии «Белуга» (воспроизводительный комплекс «Тамэдэу», на белуге и севрюге). Во всех хозяйствах осетровых воспроизводили только с применением препаратов Н5, 5А, 5Б.

Воспроизводство белуги. Материалом для работы послужила 1 ♀ белуги М 163 кг и 3 ♂ Мср. 85 кг, отловленные в Дунае при t⁰ воды 8⁰С и перевезенные в круглый бассейн, Ø 5м и глубиной 1,5м, где содержались до наступления нерестовой температуры. При t⁰ = 13°С и рО₂ = 8,8мг/л ♀ белуга была инъецирована Н5Б из расчета 20% от ОД = 0,1 мл/кг. Через 24 час. , при t⁰ = 12,8°С, ♀ ввели 60% от ОД, а после биопсии дали третью Д Н5Б – 20% от ОД. Спустя 72,5 час. от 1-ой инъекции от ♀ белуги были получены первые овулированные икринки. ♂ были инъецированы после 2-ой инъекции ♀ в дозе 50% от ОД для ♀, и через 11 час. ♂ созрели. Получение овулированных ооцитов осуществлялось прижизненно (♀ была анестезирована), методом надрезания яйцеводов с последующим отцеживанием икры. Получено 14кг овулированных ооцитов – 8,5% от М ♀. Количество икринок в 1 г. – 42 шт. Сперму ополучали методом шприцевого отсасывания. Основная масса (80%) полученных ооцитов была оплодотворена в течение 2-3 мин. полусухим методом спермой 3-х ♂ белуги, а 20% - спермой стерляди, разбавленной в воде в соотношении 1:200. Обесклеили икру суспензией речного ила в течение 40 мин., после чего икру промыли и поместили на инкубацию в аппараты «Вейса» и «Стерлядь». На 4-й день инкубации часть (15%) икры перевезли в комплекс «Тамэдэу», а оставшуюся икру инкубировали в комплексе «Исакча», при средней t⁰ = 14,8°С (13,5-15,6°С) и рО₂ = 8,8 мг/л. Основные параметры гидрохимии соответствовали норме. Продолжительность инкубации - 6,5 сут. Предличинки выдерживали в личинкосборниках 48час., после чего их пересадили в стеклопластиковые бассейны при плотности посадки10000 шт/м³. Первоначально личинок в бассейнах кормили мелкими формами зоопланктона из расчета 5г/м³, а на 10-й день в рацион стали добавлять мелконарезанный трубочник. Кормление естественным кормом продолжалось 7 дней, после чего стали добавлять стартовый комбикорм «Нутра», с постепенным замещением до 100%. Результаты инкубации, подращивания личинок и выращивания молоди белуги даны в табл. 2, а результаты инкубации, подращивания личинок и выращивания молоди бестера– в табл. 3.

Таблица 2. Белуга.

Таблица 3. Бестер (БС)

Воспроизводство севрюги. Материалом послужили 7 ♀ и 10 ♂ севрюги, выловленных из Дуная при t⁰ = 19°С в мае 2006г. Рыб перевезли в бассейны комплекса «Тамэдэу». Стимулирование овуляции и спермации осуществляли препаратом Н5А, для ♀ двукратно из расчета ОД = 0,16 мл/кг (20% + 80%), с интервалом между инъекциями 24 час. ♂ инъецировались однократно. Овулированные ооциты получали прижизненно методом надрезания яйцеводов с последующим отцеживанием. Характеристика самок севрюги, результаты инъецирования, инкубации, подращивания молоди представлены в табл. 4, 5.

Таблица 4. Севрюга (индивидуальные показатели)

Таблица 5. Севрюга (среднее)

Успешные НПИ Нерестинов в ведущих хозяйствах Румынии проводятся с 2000 г. на всех РЯР и, осетровых (белуга, осетр, севрюга, веслонос), с получением очень неплохих результатов, часть из которых опубликована нами ранее и, включая новые отчеты, размещена на официальном сайте по Нерестину: www.nerestin.ru. Это рыбхозы Румынии «Шовырка», «Тульча», «Слободзея», «Кэлэраш», «Яломица», «Нучет» и НИИ-Центр по рыбоводству – работы с РЯР, комплексы «Рэдуцэ Спортинг-Тур», «Кавиар Хаус», «Белуга» - работы с осетровыми. За период 2003-06 г.г. с применением Н5А, 5Б здесь воспроизведено потомство не менее чем от 8 ♀белуг. К сожалению НИР (в т.ч. получение полных информативных отчетов) с этими предприятиями затруднена из-за введенного в 2004 г. визового режима, некоторого языкового барьера и «местной специфики».

В ИП «Русс+» Дрокиевского р-она Молдовы (IV зона; директор – Д.П. Лисник; прежнее и более известное название рыбхоза – «Згурица») имеют 3-летний опыт испытаний Нерестина на РЯР и карпе. В 2006 году здесь после личной, по-молдавски задушевной беседы с руководителем рыбхоза, специалисты провели испытания по-научному ответственно, наблюдательно, документировано, хотя и с “накладками”, и впервые сделали тестирование Н7. А все результаты сравнили с таковыми при инъекциях гипофиза карпа (заготовлен осенью 2005 г.). Взяли 73 ♀ (Мср.=5,5 кг; 2,5-10,0 кг) и 39 ♂ карпа (Мср.=4,0 кг; 2,5-8,0 кг) и вводили им Н4, Н6 и Н6А. Молдавские производители карпа принадлежат к куболтскому чешуйчатому и разбросанному карпу, а также к породной группе теленешского карпа на основе румынского «Фресинет». Куболтские карпы 4-8-летнего возраста имели хорошо развитые половые признаки у ♀, а ♂ - текучие. Карпы «Фресинет», ♀ Мср.=5,0кг, были первонерестующими, высокотелыми и упитанными, но гонады маловыражены, а у нетекучих ♂ «Фресинет» половые признаки отсутствовали. Инъецирование этих карпов проводили согласно инструкции и рекомендаций в статьях согласно графика «Д -t⁰». В I партии (начальной) недодозировали Н6 из-за образования осадка (хлопьев) во флаконе с препаратом (причины нами выявлены и позднее устранены), и отдали икру только 62% ♀.

В двух последних партиях 20.06 и 12.07.06 г. большая часть ♀ оказалась перезревшими и даже «слили» икру в воду, т.к. содержались совместно с ♂ из-за отсутствия в хозяйстве преднерестовых прудов.

Рыбхозы Молдовы в основном сменили форму собственности и только начинают восстанавливать работу после резкого спада в 90-х годах. К 1997 г. продукция пресноводной аквакультуры в Молдове сократилась в 13 раз, до уровня 1 кг рыбы на человека в год по сравнению с 13 кг в 1990 г, а к 2004 г. выросла чуть более чем в 2 раза относительно спада. К 2004 г. частично восстановилось и производство личинок прудовых рыб и достигло уровня 300 млн.шт. (Куркубет и соавт., 2005).

В основных партиях 04.06 и 10.06.06 г. в «Згурице» отдали икру 95% ♀ карпа, в среднем по 700 г (~800 шт. икринок в 1 г). Тот факт, что полученная после введения Нерестина икра была несколько более жидкая, чем после гипофиза, указывает на некоторую передозировку препаратов. ♂ карпа здесь нормально отдавали сперму при Д =1/2 от ОД для ♀, а при Д =1/3 «срабатывали» не все ♂. Оплодотворение икры было на уровне 80-90%, однако в случаях обесклеивания икры барботажем выход личинок снижался из-за нестабильной работы компрессора – до 50-60%. При «ручном» обесклеивании развитие икры было хорошим и выход деловых личинок повышен. В процессе инкубации икры и выдерживания личинок аномалий развития практически не наблюдали. По все тем же техническим причинам (отсутствие водоотстойника и перенасыщение воды кислородом) были замечены у личинок признаки газопузырьковой болезни. Выход деловых личинок составил в среднем 380 тыс.шт. от одной ♀ с Мср.=5,5кг. 12.07.06г. апробировали Н7 на карпе при t⁰=26⁰C. Д Н7 для ♀ = 0,03+0,12 мл/кг оказалась недостаточной, хотя 2 маленькие ♀ карпа из 4-х сработали. В рыбхозе определили, что ОД Н7 для карпа должна соответствовать ОД для Н4 или быть межу ОД для Н4 и Н6. Но полученная от этих ♀ икра была очень хорошего качества, и из 900г. икры получили 800 тыс.шт. деловых личинок. В местах укола Н7 (и только у этого препарата) отмечали кровоподтеки.

В результате 3-хлетних испытаний Нерестинов на карпе в «Згурице» сделали следующие выводы: - 1. Нерестины по сравнению с гипофизом проще в работе и дешевле. 2. У ♀ отсутствует тромбообразование. 3. Нерестин, по сравнению с гипофизом, дает более полное созревание производителей, практически все подготовленные ♀ срабатывают. 4. Возможность снижения доз Нерестина при повышении t⁰ воды дает существенную экономию препарата, что не достигается при использовании гипофиза. 5. Отсутствует зависимость Д (в мл/кг) Нерестина от веса и размера производителей (!). Это нам следует уточнить – не только от массы рыб, но и от гонадосоматического индекса, от соотношения длины и обхвата тела рыбы и т.п. Действительно, Нерестин действует не на крупные, массивные гонады, а на миниатюрный гипофиз. 6. Развитие икры и личинок не отличается от полученных при использовании гипофиза, а в целом все эти показатели после применения Нерестина лучше.

Кроме карпа, в «Згурице» в 2006 г. использовано 109 ♀ и 43 ♂ РЯР. Из них ПТ 38 ♀ (15-20 кг), БТ - ♀(2,5-10кг) и БА 14 ♀ (6-8 кг). Все ♀ ПТ и мелкие ♀ БТ (2,50-3,0 кг) – с хорошо развитыми гонадами. Крупные ♀ БТ и ♀ БА были со слаборазвитыми гонадами. ♂ ПТ – 12-16 кг (21 шт.), ♂ БТ – 2,5-7 кг (18 шт.), ♂ БА – 5-6 кг (4 шт.). Погодные и гидрохимические условия при инкубации в 2006 г. были неблагоприятные. Долго продержавшиеся зимой и весной холода позволили начать инкубацию только 2 июня. Затем последовал резкий подъем t⁰ воды до 28-32⁰С, что в условиях интенсивного кормления в водоснабжающем пруду ухудшило показатели гидрохимии. В «Згурице» инкубцех снабжается водой из нагульного – 100 га – пруда без отстойника, только через фильтр из капронового газа №32. Вода имела высокую окисляемость, была загрязнена органическими взвесями, бактериями и некропланктоном. Инъецирование РЯР проводили двукратно с интервалом 12 час. в режиме «вечер-утро» с соотношением доз 20+80% препаратами Н1 и Н1А. Провели также контрольные пробы с гипофизом карпа (заготовили зимой 2006 г.) и проверили активность Н7 на РЯР. Дозы Нерестина рассчитывали согласно графика «Д -t⁰», но с корректировкой (!) на состояние производителей до предварительной и перед разрешающей инъекциями. При t⁰ воды >26⁰С дозы определялись экстраполяцией кривых в области более высоких t⁰. На предварительные инъекции для РЯР использовали Д от 0,02 до 0,16 мл/кг Н1 и на разрешающие инъекции 0,11-0,33 мл/кг Н1А. Достаточной Д для ♂ здесь оказалось 1/2 от ОД для ♀ (1/3 не давала хорошей спермиации). Овуляция происходила через 6-12 час. после второй инъекции, в зависимости от t⁰ воды (тоже в основном досрочно), причем ПТ созревали на 20-30 мин. позже БТ. Отдали икру 95% ♀ ПТ, 93% ♀ БА и всего 79% ♀ БТ (т.к. много ♀ БТ травмировалось из-за бурного поведения, пробивали дель и выпрыгивали на пол из бассейнов). Получено 78 л икры от 97 ♀ , в т.ч. ПТ – 45 л. (1,3л/♀), БТ – 28 л. (0,6л/♀), БА – 5,3л (0,4л/♀). Качество икры в основном было хорошим, а снижение качества наблюдали только при раннем или позднем ее получении, а также при слишком высокой t⁰ воды (28-32⁰С). Оплодотворение, поэтому, в среднем было на уровне 80%. Аномалии развития икры и личинок не превышали 5-10%, кроме отмеченных выше случаев по срокам и t⁰ воды. В среднем выход деловых личинок РЯР в «Згурице» в 2006 г. составил ~50% от полученной икры, в т.ч. ПТ – 56%, БТ – 50% и БА – 40%. А вот снижение выхода произошло в период высоких t⁰ из-за сильного поражения личинок некропланктоном (в основном инфузориями) на стадиях набора плавательного пузыря и начала работы жаберного аппарата. Общий выход деловых личинок РЯР в этом рыбхозе составил 35 млн. шт. из 78 л икры (~ 70 млн. шт. икринок). Контрольная партия РЯР с использованием гипофиза не показала значительных отличий от опытных партий с Нерестином в качестве икры и развитии личинок.

Особенно важно следующее. – В «Згурице» замечено, что при введении Нерестина нет разницы в дозировке для карпа и РЯР (в мл/кг) в зависимости от веса рыб, в отличие от введения гипофиза, при котором такая разница существенная. Поясним это. – Дозировки гипофиза для РЯР: 2,5 мг/кг для ♀ ПТ 2,5-3,0 кг и 4 мг/кг для ♀ ПТ 5,0-6,0 кг сработали по графику, а вот доза гипофиза 5,5 мг/кг на ♀ ПТ массой 18,0 кг вызвала овуляцию только через 20 час. При применении Нерестина Д (в мл/кг) зависела лишь от t⁰ воды (но не от массы рыб, размера, соотношения «длина-обхват») и у ♀ от 2,5 до 20 кг (!) обеспечивала своевременную и полную овуляцию. При этом состояние ♀, инъецированных Нерестином, было значительно лучше, чем ♀, получивших гипофиз (♀ гладкие, активные, нет помутнения глаз, отчетливо ощутим брачный наряд).

И в работе с РЯР отмечена лучшая выживаемость ♀ при работе с Нерестином. Особо и повторно отмечена антигельминтная активность Нерестина – уже 2-й год наблюдается гибель ботриацефалюса и гвоздичников у РЯР после применения Н1 и Н1А (это скромное и побочное наше достижение – авт.). В ходе инкубации также проверили минимально возможные Д Н1, Н1А при высоких (более 26⁰С) t⁰ воды. По-видимому, как определили в «Згурице», минимальной Д, вызывающей своевременную овуляцию у ♀ РЯР, является 0,03 мл/кг на предварительную и 0,11 мл/кг Н1А на разрешающую, итого – 0,14 мл/кг Н1А – минимальная ОД для РЯР при номинале на этикетке флакона 0,25 мл/кг. Примененные Д 0,02 мл/кг Н1 (предварительная) при t⁰=28⁰C и 0,11 мл/кг Н1А (разрешающая) привели к задержке овуляции на 6 час. и неполной отдаче икры, несмотря на увеличение интервала между инъекциями до 16 час.

Испытние нового препарата Н7 в «Згурице» показало его очень высокую эффективность на РЯР. Предварительная Д 0,03 мл/кг и разрешающая Д 0,09 мл/кг (ОД = 0,12 мл/кг) при 25⁰С вызвали досрочную (раньше на 2 часа) овуляцию у ♀ БТ при удовлетворительном качестве икры. Вероятно, на РЯР активность Н7 (во флаконе с Н7 – 50 доз с номиналом 0,4 мл/кг) на ~ 20-25%, выше, чем Н1А (во флаконе с Н1А – 80 доз с номиналом 0,25 мл/кг). Тогда получается, что 1 флакон Н7 реально содержит не менее 100 (до 150) действующих Д для ♀ БТ, а расчетная цена его в 2006 г. для договоров о НИР и НПИ была существенно ниже, почти в 2 раза, чем 1 фл. Н1А.

3-летняя практика испытания Н1, Н1Б, Н1А в «Згурице» позволила специалистам рыбхоза сделать выводы, что по сравнению с гипофизом Нерестин имеет следующие преимущества: простота применения; точность дозировки (препараты унифицированы); хорошая переносимость Нерестина производителями и их высокая выживаемость после инъекций и взятия половых продуктов; более высокий % созревания производителей, практически полное отсутствие тромбообразования ястыка; сравнительная экономичность, дешевизна препаратов; но применение Нерестина требует высокой квалификации персонала в работе с производителями. Общий экономический эффект по выходу личинок карпа и РЯР при работе с Нерестином в «Згурице» в 2006 г. составил не менее 1500$; всего здесь, в индивидуальном предприятии, за сезон получено 51,6 млн. шт. деловых личинок карпа, БТ, ПТ, БА, т.е. около 20% всех личинок прудовых рыб, произведенных в Молдове. Кроме «Згурицы», в Молдове НИР и НПИ с Нерестином проводятся сотрудниками Кишиневской НИРХС П.Д. Ариковым и А.И. Ведрашко в рыбхозах «Костешты», «Иванча», «Данчень», а также в «Слободзее» (Приднестровье).

И некоторые полезные для анализа этих материалов примечания. Первое. - Осень 2005 г. в Молдове была очень теплая и затяжная. Первые морозы начались только в середине января 2006г. В связи с этим в мае-июне 2006 г. часть производителей РЯР (особенно крупные экземпляры старших возрастных групп) оказались перезревшими, с резорбированной икрой. Они плохо реагировали на инъекции, давали некачественную икру. Но этого не было выявлено на меньших по размеру, более молодых производителях, особенно не проявлялось на первонерестующих рыбах. Последние в этой ситуации лучше реагировали на инъекции и давали хорошие икру и сперму. Второе. - Плохая спермиация у ♂ ПТ – как правило, результат ошибок в бонитировке. Попадаются малопродуктивные гибриды ПТ и БТ. Третье. - В области высоких t⁰ в конце инкубации (как было в «Згурице») лучше работать на ♀ РЯР при обеих инъекциях не с Н1А и Н1Б, а с Н1, во избежание передозировок препарата (существовавший до 2006 г. график «Д -t⁰» для РЯР заканчивался на 27⁰С), т.к. очень малые Д сильноактивных препаратов приходится вычислять экстраполяцией кривых и дозировать с большой вероятностью ошибок. Применение Н1 может позволить работу в IV-VII зонах в конце сезона на перезревающих рыбах и в диапазоне t⁰=27-29⁰С.

Все основные материалы по «Згурице» иллюстрирует таблица 6.

Таблица 6. Результаты нерестовой кампании в ИП «Русс» в 2006 г., с. Згурица, Молдова.

Таблица 6

* - Н6 – с осадком (недодозировка)

** - очень высокая t⁰. При наборе плавательного пузыря наблюдался отход личинки в аппаратах.

*** - ПТ ♀ созрела 2.07 к 4⁰⁰ (перезрелая икра). Из 2,8 л. – 2,2 – от Нерестина, 0,6 – от гипофиза.

Что касается испытания Нерестинов на перспективном объекте тепловодного рыбоводства - клариевом соме, то эти работы проводили только на теплой воде в ООО «Акватория» Орловской обл. РФ (III зона; ген. директор – С.И. Клепов, рыбовод Ю.А. Юшкова), а также сотрудниками Института проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцева РАН О.А. Солдатовой и В.М.Ольшанским (Москва) на рыбной ферме Юго-Востока Вьетнама. В ООО «Акватория» 15.05.06 г. взяли 2 ♀ клариевого сома (Clarius gariepinus) М 700 и 900 г. и при t⁰ = 28⁰С в 8⁰⁰ однократно им ввели Н6А в ОД 1,0 мл/кг. ♂ не инъецировали. 1 ♀, которая имела повреждения кожного покрова, погибла, а другая ♀ созрела через 10 час. (130 г икры), но икра была плохая, с большим количеством овариальной жидкости. 27.06.06 г. взяли 4 ♀ (1,0-1,3 кг) в хорошем состоянии и при t⁰ = 28⁰C ввели им Н6А двукратно в ОД = 1,25 мл/кг с интервалом 12 час. (20% в 9⁰⁰ и 80% в 21⁰⁰). ♂ не инъецировали. 2 ♀ созрели через 24 час., дали в среднем 177 г. икры хорошего качества. Оплодотворено сухим способом 95% икры, вылупилось из нее 30% личинок через 24 час. инкубации, а через 3 сут. выжило 84,5%. У личинок отмечали случаи водянки полости тела. 17.10.06 г. брали в опыт 4 ♀ (0,8-1,1 кг) в хорошем состоянии и при t⁰ = 28⁰С в 21⁰⁰ однократно им ввели Н6А в ОД = 1,25 мл/кг. Все ♀ созрели (100%), в среднем от каждой получили по 140,5 г икры хорошего качества с Мср. икринки 1,53 мг; общая рабочая плодовитость – 91830 икринок/♀, относительная – 95400. Оплодотворилось 99% икры, через 22 час. вылупилось 46,4%. Отмечено беспокойное поведение производителей после инъекций. Наконец, 18.10.06 взяли 7 ♀ (1,12 – 1,44 кг) и однократно в 20⁰⁰ им дали Н6А (1,25 мл/кг). Опять созрело 100% ♀, но через 10 час., получено в среднем по 224 г икры хорошего качества с Мср. икринки 1,56 мг. Общая рабочая плодовитость – 143600, относительная – 100000. Оплодотворено 98,5% икры, через 22 час. при t⁰ = 29⁰C вылупилось 45% по отношению ко всей икре. Также отмечены беспокойное поведение производителей и некоторые аномалии развития. Невысокий выход деловых личинок, беспокойное поведение рыб и аномалии развития, скорее всего, могут быть устранены дробностью инъецирования (20% + 30% + 50%) с интервалом до 24 час. при снижении ОД до 1,0 мл/кг.

Во Вьетнаме О.А. Солдатова 29.04-21.05.2005г. испытала препарат для аквариумистов Н2 (аквариумный аналог Н1А) на 8 ♀ и 8 ♂ Clarius gariepinus Мср.=200 г (М ♀ - 150-230 г, М ♂ - 200-250 г). Рыбы здоровые, хорошо кормленные. Работали в диапазоне t⁰=23-26⁰С. ОД Н2=2,0 мл/кг, вводили двукратно (50%+50%) с интервалом 12 час. (в 00³⁰ и в 12³⁰). ♂ давали 1/2 от ОД ♀ (1 мл/кг) во время второй инъекции ♀. Через 15 час. Созрело 70% ♀ и 60% ♂. Далее, к сожалению, изучение не проводили, т.к. интересовались только нерестовым поведением рыб. В 2006 г. взяли 4 ♀ и 4 ♂ Clarius macrocephalus и 4♀ и 5 ♂ гибридов C.garipinus и C.macrocephalus. Масса C.m. – 180-220 г., масса C.g. х C.m. – 240-550 г., t⁰ воды = 27-29⁰С, рН = 7,5. Применили Н7 в ОД до 1,0 мл/кг для ♀ двукратно (20%+80%, с вариациями от 10%+90% до 30%+70%) с интервалом 7-10 час. Минимальная Д Н7 для ♀ была 0,1+0,25 мл/кг. ♂ вводили 50% от ОД ♀ во время разрешающей инъекции. Созрело 100% ♀ и 80% ♂ через 10 час. Визуальное качество половых продуктов – в норме, оплодотворение – 77%. На гибридах также пробовали Н2 и Н6, но результаты были несколько хуже. Когда изменяли соотношение доз на 70+30% и 50+50%, происходила задержка нереста на 5-7 час.

Другие результаты по клариевому сому пока отсутствуют. Но и это уже «кое-что»! Итак, Нерестин в принципе работает на канальном, на клариевом (+ гибрид) сомах и на соме Солдатова. Следует дальше отлаживать технику искусственного воспроизводства сомов, но предпочтительно с Н6 (6А) и Н7 (7А).

Что касается первых испытаний Н7 и Н7А на лососевых рыбах, то они начаты только осенью 2006 года на кете в Анюйском лососевом рыборазводном заводе ФГУ «Амуррыбвода» (Хабаровский край РФ) и результатами для анализа мы пока не располагаем.

Теперь о двух известных нам по 2006 году неудачах. В ООО «Агрофирма «Маяк» (племрыбхоз «Зеркальный») Алтайского края не сработал первый флакон Н6А (вероятно, был брак флакона по ошибке оператора, т.н. «человеческий фактор»; в 2006 г. таких случаев больше нигде не было). Именно из этого неудачного флакона опытные специалисты племрыбхоза при участии научных сотрудников кафедры зоологии и рыбоводства Новосибирского аграрного университета провели две инъекции ♀ алтайского зеркального карпа и 1 инъекцию ♂. Сделали все по инструкции, но в положенное время рыбы не созрели. Пришлось делать ♀ 3-ю инъекцию из второго флакона (♂ больше не кололи), и только после этого созревание 13 ♀ из 16-ти (фактически ♀ получили только 1 Д – из 3-х уколов, всего 0,2 мл/кг) произошло через 12 час.15мин. (81,25%). ♂ отдали сперму в низких пределах, как без инъецирования (фактически они и не получили препарат из-за брака первого флакона). В итоге измеренные показатели эффективности Нерестина оказались несколько ниже, чем при использовании гипофиза. Лаборатория аквакультуры ПущГУ сразу и за свой счет (как только стало известно о не «срабатывании» двух инъекций из одного флакона) сделала экспресс-отправку новой партии препаратов Н6, 6А в объеме первого заказа и плюс 4 флакона Н4 в адрес племрыбхоза. Надеемся, что в 2007 г. испытания Нерестина на алтайском карпе в этом хозяйстве будут проведены успешно.

И второй случай. – Неудача с Н1А на 5 ♀ БТ постигла рыбоводов из ООО «Рыбколхоз им. И.В. Абрамова» Ростовской обл. РФ, (V зона). 03-04.06.06 г., в самом начале сезона инкубации с РЯР, при t⁰ воды 22,8-25⁰С ♀ ввели Н1А в ОД 0,17 мл/кг двукратно (20+80%) с интервалом 24 час., и ♀ не созрели. Предшествующая зима была очень морозной, весна – затяжной. Как только начался подъем t⁰, рыбоводы сразу начали работать с РЯР. Скорее всего, производители к 03.06.06 г. просто не добрали «градусо-дней» и были менее подготовлены к нересту. Следовало в начале инкубации давать более высокие ОД для ♀ РЯР, хотя бы по номиналу Н1А - 0,25 мл/кг или даже немного выше, а не действовать прямолинейно исходя из усредненного графика «Д -t⁰», без учета состояния производителей и климатических факторов. Так, по данным мониторинга погоды в Ростове-на-Дону за 2006 г. (www.pogoda.ru.net/monitor), в январе средняя t⁰ воздуха была ниже нормы на 6,0⁰С (х 31 день = 186 «воздушных» градусо-дней в дефиците), в феврале – ниже нормы на 2,7⁰С (х 28 = 75,6 дефицита), в мае – на 0,7⁰С (х 31 = 21,7). 29.05.06 г. t⁰ воздуха была ниже нормы на 5,0⁰С и начала расти только с 31.05.06, а затем, к концу первой декады июня опять упала даже на 6,3⁰С ниже среднего уровня и восстановилась только к 20.06.06. В этих климатических условиях просто недодозировали препарат в первой пробе на 5 ♀, поэтому не получили овуляцию и затем продолжили работу на привычном гипофизе, ничего своевременно не сообщив разработчикам. Надеемся, что материалы этой статьи позволят специалистам рыбколхоза начать работу с Нерестином в 2007 г. более оптимально.

Все основные вопросы, связанные с применением Нерестина в искусственном воспроизводстве рыб, изложены в №9 этого журнала за 2006 г. Там же в списке литературы приведены ранее опубликованные работы с оригинальными данными, графиками «Д –t⁰» и с обобщением материалов по видам рыб.

Что касается многочисленных аквариумистов, то на нашем сайте www.nerestin .ru в разделе «Аквариумистам» для них размещен специальный договор публичной оферты о НИР и НПИ по Нерестину с 5-ю приложениями, по которому и предлагаем далее сотрудничать. Этот договор в сфере рыборазведения действует для любых физических и юридических лиц.

В заключение благодарим всех руководителей и специалистов организаций, предприятий, хозяйств, упомянутых в этой статье, за предоставление нам отчетов об испытаниях Нерестина в 2006 году, и надеемся, что материалы статьи помогут улучшить в дальнейшем и масштабировать по регионам РФ и других государств работу по искусственному воспроизводству рыб. Также благодарим научную сотрудницу ИБФМ РАН Т.В. Юркову, аспирантку Н.А. Ивличеву, зав. лаб. экологии П.В. Машкина и проректора ПущГУ Л.Н. Савельеву за техническое и организационное содействие данной работе.